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离子交换色谱柱 BioPro IEX系列

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离子交换色谱柱BioPro IEX系列

是针对蛋白、核酸等生物医药品纯化与分析而开发的离子交换色谱柱。该系列产品采用非特异性吸附极低的亲水聚合物为基质,键合强阴/阳离子官能团而成。既有非常适于生物医药品(如抗体类)特征解析及品质管理等要求的高分离能力的无孔类型色谱柱,亦有适于实验室级别纯化的高分离、高吸附量的多孔型色谱柱。同时备有用于初期及中期制备的离子交换填料。

要点

■  采用非特异性吸附极低的亲水聚合物为基质

■  使与官能团相互作用最大化的表面构造

■  紧密的装填技术实现了以往没有的高理论塔板数和优秀的峰对称性

■  高动态吸附容量及回收率的多孔型色谱柱适于从分析到少量纯化

■  专为超高速、高效分析而设计的无孔型色谱柱

■  非常适于生物医药品(如抗体)特征解析与品质管理

Ø  纯化制备用离子交换填料BioPro IEX系列产品

规格一览

强阴离子交换色谱柱

BioPro IEX QF

强阳离子交换色谱柱

BioPro IEX SF

强阴离子交换色谱柱

BioPro IEX QA

强阳离子交换色谱柱

BioPro IEX SP

基质

亲水性五孔聚合物

亲水性多孔聚合物

颗粒径(μm)

3,5

5

离子交换官能团

-CH2N+(CH3)3

-CH2CH2CH2SO3-

-CH2N+(CH3)3

-CH2CH2CH2SO3-

出厂时的对离子

Cl-

Na+

Cl-

Na+

离子交换容量(meq/mL-resin)

0.075-0.11

0.23-0.29

0.075-0.1

0.07-0.095

动态吸附容量(mg/mL-resin)

DBC>12 (BSA)

DBC>10 (human-lgG)

DBC>110 (BSA)

DBC>70 (human-lgG)

适用温度范围

4-60

适用pH范围

2.0~12.0

柱管材质

PEEK

 

产品特点

| 短时间内实现良好的分离-单克隆抗体的分析

下图为使用BioPro IEX SF与市面上销售的色谱柱在pH 5.6的相同梯度条件下对单克隆抗体分离的比较谱图。

 

与市面上销售的色谱柱相比,BioPro IEX SF分离时间短且峰形尖锐,分离效果更佳。

Eluent

A)     20 mM MES-NaOH (pH 5.6)

B)     20 mM MES-NaOH (pH 5.6) containing 0.2 M NaCl

Initial gradient conc.

35%B (70 mM NaCl

Gradient slope

0.25%B/min (0.5 mM NaCl)

Flow rate

180 cm/hr

(0.5 mL/min for 100 X 4.6 mmI.D.

0.378 mL/min for 250 X 4.0 mmI.D.)

Temperature

30

Detection

UV at 280 nm

Injection

10 μL

Sample

Humanized monoclonal IgG1 (1 mg/mL)

| 卓越的再现性~单克隆抗体的分析

下图显示了BioPro IEX SF的批次再现性。

 

每一批次的填料均有很高的分离能力,并展现出卓越的批次间再现性,因此非常适用于注重批次再现性的生物医药品的品质管理。

Column

BioPro IEX SF 5 μm, 100 X 4.6 mmI.D.

Eluent

A)     20 mM NaH2PO4-Na2HPO4  (pH 6.5)

B)     20 mM NaH2PO4-Na2HPO4  (pH 6.5) containing 0.2 M NaCl

0-50%B (0.5-30 min)

Flow rate

0.5 mL/min (180 cm/hr)

Temperature

25

Detection

UV at 215 nm

Injection

10 μL

Sample

monoclonal antibody (IgG1)

| 适于超高速分析的30mm柱长的无孔色谱柱

从无孔型色谱柱与多孔型色谱柱对蛋白质的分离比较中可以看出,BioPro IEX色谱柱中的无孔型基质具有优秀的机械强度,可通过提高流速进行快速分析达到提高柱分析效率的目的。

1.        Ribonuclease A核糖核酸酶

2.        Cytochrome c细胞色素c

3.        Lysozyme溶菌酶

 

 

Eluent

A)     20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8)

B)     20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) containing 0.5 M NaCl

0-100%B (0-4 min) for BioPro IEX SF

0-100%B (0-60 min) for BioPro IEX SP

Temperature

25

Detection

UV at 220 nm

Injection

20 μL

| 高动态吸附容量&高回收率

BioPro IEX色谱柱中的有孔型色谱柱是一款将非特异性吸附降低到很小的亲水性聚合物为基质的离子交换色谱柱,因有易于与蛋白质进行相互作用的表面构造,因此对蛋白质展示出很高的动态吸附容量与高回收率。

 

BSA的动态吸附容量及回收量

 

动态绑定容量

(mg/mL-resin, 10% breakthrough)

洗脱量

(mg/mL-resin)

回收率

(%)

BioPro IEX QA

126

120

95

A (porous Q type)

73

58

79

B (porous Q type)

100

35

35

*回收率:(洗脱量/动态绑定容量)× 100

Column

BioPro IEX QA 50 X 4.6 mmI.D.

A)     (porous Q Type) 50 X 4.6 mmI.D.

B)     (porous Q Type) 50 X 5.0 mmI.D.

Linear velocity

180 cm/hr

Sample

1 mg/mL Bovine serum albumin (BSA) inequilibration buffer

Equilibration buffer

20 mM Tris-HCl (pH 8.6)

Elution buffer

20 mM Tris-HCl (pH 8.6) containing 1.0 M NaCl

Detection

UV at 280 nm

| 即使高载样量条件下仍维持高分离性能的高吸附能力

对于市售色谱柱即使载样量不大时,也常常存在峰形差分离不佳的情况。而BioPro IEX QA即使在高载样量的情况下也显示出良好的峰形,可用于那些希望提高上样量以便于检测小峰的情况。同时,由于具有很高的回收率,因此也适用于小规模的纯化制备。

 

 

大量上样时的分离能力

1.        Ovalbumin卵清蛋白

2.        Trypsin inhibitor胰蛋白酶抑制剂

Eluent

A)     20 mM Tris-HCl (pH 8.1)

B)     20 mM Tris-HCl (pH 8.1) containing 0.5 M NaCl

10-80%B (0-30 min)

Flow rate

0.5 mL/min

Temperature

25

Detection

UV at 280 nm

Injection

100 μL

 

 

 

填料

颗粒径

µm

孔径

柱尺寸

内径×柱长 (mm)

产品型号

BioPro IEX QA

5

porous

4.6 X 30

QAA0S05-0346WP

4.6 X 50

QAA0S05-0546WP

4.6 X 100

QAA0S05-1046WP

BioPro IEX SP

5

porous

4.6 X 30

SPA0S05-0346WP

4.6 X 50

SPA0S05-0546WP

4.6 X 100

SPA0S05-1046WP

BioPro IEX QF

3

non-porous

4.6 X 30

QF00S03-0346WP

4.6 X 50

QF00S03-0546WP

4.6 X 100

QF00S03-1046WP

5

non-porous

4.6 X 30

QF00S05-0346WP

4.6 X 50

QF00S05-0546WP

4.6 X 100

QF00S05-1046WP

BioPro IEX SF

3

non-porous

4.6 X 30

SF00S03-0346WP

4.6 X 50

SF00S03-0546WP

4.6 X 100

SF00S03-1046WP

5

non-porous

4.6 X 30

SF00S05-0346WP

4.6 X 50

SF00S05-0546WP

4.6 X 100

SF00S05-1046WP

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