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2025
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告别繁琐前处理!寡核苷酸合成「过程监控」进入秒级时代!
寡核苷酸已成为分子生物学、诊断学和治疗开发中的工具。合成寡核苷酸因化学修饰、长度增加和结构多样而日益复杂,对快速、准确且无需复杂前处理的分析技术的需求日益迫切。传统的分析方法虽然有效,但通常需要大量的样品纯化或基质优化,这使得它们耗时且不太适合高通量检测或过程监控。
为解决这些局限性,AIS OPSI 开放式采样端口与 CMS 质谱联用,为寡核苷酸的直接、快速、常压分析提供了一个强大的解决方案。这项创新技术将新颖的采样接口与质谱仪相结合,能够在样品制备量极少的情况下实现样品实时分析。OPSI-CMS 便于从复杂基质(如反应混合物、缓冲液或粗合成产物)中直接进样,从而显著简化了寡核苷酸的鉴定工作流程。
一、实验方法

实验仪器:所有实验均在 AIS OPSI-CMS 联用系统上进行。
流动相:含有 10 mM TEA 和 10 mM HFIP 的 95/5 甲醇/水混合物。流速为 0.15 ml/min。
样品信息:使用了分子量分别为 14744.6 和 6993.6 的两个寡核苷酸样品作为方法评估的示例。样品溶解于水中。
进样量:将 3 微升样品移液到 OPSI 样品端口进行分析。
二、实验结果

图 1: 样品 1:分子量为 14744.6
将 3 微升溶液加至 OPSI 接口。可在数秒钟内获得 500 至 2000 Da 质量范围内的质谱图。总离子流图如图 1A 所示,平均质谱图如图 1B 所示。使用自动电荷去卷积功能,仅需点击两次即可基于平均质谱图测量未带电质量。未带电质谱图如图 1C 所示,测得的质量为 14744.0,接近报告值 14744.6。

图 2: 样品2:分子量为 6993.6
将 3 微升溶液加至 OPSI 接口。可在数秒钟内获得 500 至 2000 Da 质量范围内的质谱图。总离子流图如图 2A 所示,平均质谱图如图 2B 所示。使用自动电荷去卷积功能,仅需点击两次即可基于平均质谱图测量未带电质量。未带电质谱图如图 2C 所示,测得的质量为 6993.0,接近报告值 6993.6。
三、实验结论

对于寡核苷酸研发与生产而言,OPSI-CMS 技术犹如装上了「实时监控眼」。它将原本可能需要数小时的分析过程,压缩到以秒计算,真正实现了对合成过程的即时洞察,为加速寡核苷酸药物和诊断试剂的开发提供了强大动能。
AIS OPSI-CMS 系统,解决了传统检测方法的难题:
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「直击核心」:直接从反应混合物、粗样品等复杂基质中取样分析,省去纯化步骤。
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「秒级速度」:只需极少量样品,数秒内即可获得质谱图。
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「结果精准」:案例显示测量结果与理论值偏差均 < 0.2 Da,准确度高。
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「一键解卷积」:软件内置自动电荷去卷积功能,点击两下即可得到目标分子量,操作极其简便。
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